卵形鲳鯵加工副产物中明胶的提取工艺及性质研究(四) 卵形紫外光谱分析显示

(2)紫外光谱分析
卵形鲳鯵加工副产物明胶与市售明胶紫外光谱扫描结果见图8。卵形
紫外光谱分析显示,鲳鯵市售明胶和卵形鲳鯵加工副产物明胶的加工最大吸收波长均在235nm处,与鲤鱼骨明胶最大紫外吸收峰235nm和大鲵皮明胶最大吸收峰234nm基本一致,副产紫外吸收峰主要是物中由电子的N-π*和N-σ*幸跃迁所产生。此外,明胶加工副产物明胶还有一个小的取工吸收峰(250~280nm处),这可能与明胶存在少量芳香族氨基酸有关。艺及研究
(3)傅里叶红外光谱分析
卵形鲳鯵加工副产物明胶与市售明胶傅里叶红外光谱扫描结果见图9。性质
酰胺A是卵形由N-H伸缩振动或O-H伸缩振动产生的吸收峰,市售明胶及卵形鲳鯵加工副产物明胶酰胺A的鲳鯵吸峰值分别出现在3408.21cm-1处和3330.20cm-1处,但两种明胶吸收峰都有变宽,加工这是副产由于当多肽中N-H基团参与形成氢键,酰胺A通常向低波数移动,物中且谱峰变宽;酰胺B是明胶由=C-H和-NH+3的不对称拉升引起,市售明胶和加工副产物明胶都在2933.72处出现吸收峰;酰胺I由C=O伸缩振动引起,其吸收峰一般出现在1600~1700cm-1处,由于不受肽链侧基的影响,是研究明胶二级结构的最有效部分,市售明胶和加工副产物明胶酰胺I的吸收峰分别出现在1654.92和1652.99cm-1,但加工副产物明胶的吸收峰有向低波数移动,这是由于热提过程中明胶分子的肽链结构得以伸展,导致螺旋度变少,整个蛋白的无序结构增加;酰胺Ⅱ、Ⅲ与N-H弯曲振动和C-N伸缩振动有关,其吸收峰分别在1549~1558cm-1、1200~1300cm-1范围内,市售明胶和加工副产物明胶酰胺Ⅱ的吸收峰分别出现在1550.76和1541.12cm-1以及酰胺Ⅲ的吸收峰都出现在1240.22cm-1处。其中酰胺Ⅲ反映了胶原蛋白的三螺旋结构的完整性,由此可看出本法提取的明胶产品较好的保持了基本的三股螺旋结构。
(4)SDS-PAGE电泳分析
卵形鲳鯵加工副产物明胶与市售明胶SDS-PAGE电泳结果见图10。
图10的SDS-PAGE电泳图谱显示,市售明胶和卵形鲳鯵加工副产物明胶均有明显的3条带,α1链、α2链和一条β链,与标准蛋白Marker对照,市售明胶和加工副产物明胶的α1链分子量约为125kDa,α2链分子量约为119Da,β链分子量约为245kDa,这与吴潇扬和廖伟等等明胶电泳分子量结果相似。由此显示,本法较好的保持了明胶基本的三股螺旋结构。
(5)氨基酸组成分析
卵形鲳鯵加工副产物明胶氨基酸的组成测定结果见表5。
表5显示,卵形鲳鯵加工副产物明胶中,氨基酸是甘氨酸、谷氨酸、脯氨酸和天冬氨酸含量较高,酪氨酸和甲硫氨酸的含量相对较少,而未能发现胱氨酸残基。其中甘氨酸含量最高达到为5.452%±0.39%,甘氨酸是大多数明胶中的主要氨基酸,高于卵形鲳鯵鱼肉中的甘氨酸1.79%±0.35%;此外,羟脯氨酸和脯氨酸是胶原蛋白的特征氨基酸,加工副产物明胶的脯氨酸含量相对较高,为2.864%±0.05%,而且这类氨基酸在其它蛋白质的氨基酸组成中很少出现,因此说明了酸碱处理之后有利于杂蛋白的除去。对于未能测定出的胱氨酸,可能是因为由于提取条件的问题而造成了这类氨基酸成分的损失,本产品含有7种必需氨基酸(色氨酸未测)。
三、结论
卵形鲳鯵加工副产物明胶提取最佳工艺条件为0.8%Na0H处理2h,水洗至中性后再使用0.4%HCl处理1h,最后在60℃下热提6h,此工艺下明胶的得率达到45.41%。卵形鲳鯵加工副产物明胶的凝胶强度和黏度均属于中等水平,满足食用明胶的标准。紫外和红外光谱分析显示,具有明胶的特征吸收峰;SDS-PAGE电泳分析,该明胶具有三股螺旋结构;明胶产品的主要氨基酸为甘氨酸、谷氨酸、脯氨酸和天门冬氨酸,其中,明胶的主要组成氨基酸,甘氨酸含量最高(5.452%);胶原蛋白的特征氨基酸脯氨酸的含量相对较高(2.864%),表明卵形鲳鯵加工副产物中所提明胶品质较好,本研究可以为卵形鲳鯵加工副产物明胶的制备提供理论依据,为卵形鲳鯵一体化的深加工提供参考。
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相关链接:酰胺B,明胶,氨基酸,谷氨酸,天冬氨酸
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